Giải thích: Năm bước để phát hiện coronavirus (COVID-19)

Tiến sĩ V Ravi, Giáo sư cấp cao & Trưởng khoa Thần kinh học, NIMHANS, giải thích cho The Indian Express.

Máu giả được nhìn thấy trong các ống nghiệm được dán nhãn coronavirus (COVID-19) trong hình minh họa này được chụp vào ngày 17 tháng 3 năm 2020. (Reuters)

Tiến sĩ V Ravi, Giáo sư cao cấp và Trưởng khoa Thần kinh học, NIMHANS, giải thích quá trình phát hiện coronavirus để Trang web này . Đây là năm bước:

Thu gom và vận chuyển

Trung tâm xét nghiệm lấy gạc từ các hốc mũi và sau họng (hầu), và đặt mẫu vào môi trường vận chuyển vi rút, có chứa muối cân bằng và albumin để ngăn vi rút phân hủy. Sau đó, mẫu được vận chuyển trong kho lạnh đến phòng thí nghiệm thử nghiệm.

Tách chiết RNA của virus

Các loại coronavirus như SARS-CoV (xuất hiện ở Trung Quốc năm 2002-03), MERS-CoV (xuất hiện ở Ả Rập Saudi năm 2012), hoặc SARS-CoV-2 hiện tại đã gây ra đại dịch COVID-19, có , bộ gen RNA sợi đơn. Phòng thí nghiệm kiểm tra chiết xuất RNA từ các mẫu, sử dụng các bộ dụng cụ bán sẵn trên thị trường (chẳng hạn như các bộ do các công ty như QIAGEN sản xuất).

Đưa RNA vào hỗn hợp PCR

RNA chiết xuất được thêm vào hỗn hợp phản ứng chuỗi polymerase (PCR). Điều này bao gồm 'hỗn hợp chính', chứa một enzym 'sao chép ngược' có chức năng chuyển RNA thành DNA. Hỗn hợp chính chứa Taq polymerase, loại enzyme tạo ra các bản sao của DNA, nucleotide, cũng như các nguyên tố khác như magiê - một ion cần thiết để khuếch đại DNA.

Hỗn hợp PCR cũng chứa các ‘thuốc thử’ như ‘mồi’ và ‘đầu dò’. Mồi là những sợi DNA cụ thể được thiết kế để liên kết với DNA sẽ được sao chép; đầu dò được sử dụng để phát hiện trình tự cụ thể trong mẫu DNA. WHO đã khuyến nghị các loại mồi và đầu dò cụ thể để kiểm tra COVID-19.

Cuối cùng, hỗn hợp PCR bao gồm một gen quản lý - một gen bình thường của người (RNase P) được sử dụng để đảm bảo rằng các mẫu được thu thập đúng cách và RNA được chiết xuất.

Khuếch đại DNA của virus

Mẫu, trong hỗn hợp PCR của nó, được đưa vào các ống hoặc đĩa, sau đó được đưa vào máy xử lý nhiệt được sử dụng để tiến hành quá trình PCR.

Đầu tiên, RNA được chuyển đổi thành DNA. Sau đó, quá trình sao chép các gen bắt đầu. Bộ xử lý nhiệt làm nóng và làm nguội hỗn hợp với mẫu, xen kẽ giữa ba nhiệt độ - để làm tan chảy DNA để tách hai sợi, để mồi liên kết với DNA và để tổng hợp một sợi mới - tất cả đều trong một chu kỳ kéo dài phút. Bộ tuần hoàn nhiệt chạy 30-40 chu kỳ như vậy để khuếch đại DNA để kiểm tra vi rút.

Thử nghiệm chống lại các điều khiển

DNA khuếch đại được kiểm tra đối với đối chứng dương tính, thường bao gồm các gen của vi rút được nhân bản thành plasmid và đối chứng âm tính, là mẫu ‘đã biết’ đã xét nghiệm âm tính với vi rút trước đó.

RNase P nên cho thấy sự khuếch đại, kiểm soát dương tính phải là dương tính, kiểm soát âm tính nên là âm tính, và sau đó bất kỳ kết quả nào bạn nhận được đối với mẫu vật, đều là kết quả chính xác, bác sĩ thần kinh học, Tiến sĩ V Ravi cho biết. Để một bài kiểm tra có hiệu lực trước khi kết quả được công bố, một số 'tiêu chí hợp lệ' nhất định phải được đáp ứng.

Đừng bỏ lỡ từ Giải thích | Cách thức hoạt động của bài kiểm tra COVID-19

Nếu gen giữ nhà (RNase P) là dương tính, đối chứng dương tính là dương tính, đối chứng âm tính là âm tính và mẫu không cho kết quả PCR dương tính, thì mẫu đó được tuyên bố là âm tính với RNA của virus SARS-CoV-2. Nếu kết quả PCR dương tính, bệnh nhân có COVID-19.

Chia Sẻ VớI BạN Bè CủA BạN: